一、细菌生化检验实验的介绍

石蕊既是pH值指示剂,也是氧化还原指示剂。在酸性溶液(pH 4.5)中呈红色,在碱性溶液(pH 8.3)中呈蓝色。培养基的自然颜色应为紫蓝色(pH 6.8)。石蕊可以被某些细菌还原成无色的基质。

牛奶含有乳糖和三种主要蛋白质,即酪蛋白、乳蛋白和乳球蛋白。

乳凝主要是由含有凝乳酶的细菌引起的,凝乳酶能将酪蛋白转化为酪蛋白,或由于乳糖发酵产生大量酸而使酪蛋白沉淀。

有些细菌产生脂肪酶,能分解牛奶中的脂肪,形成黄色透明液体。

有些细菌有酪蛋白水解酶,可以催化酪蛋白水解,最终转化为透明的液态酪蛋白沉淀。这个过程被称为肽化。

二、细菌生化检验试剂

没有产品编号。卡斯诺。:备注

1.脱脂奶粉HC1218

2.石蕊HXH502289 1393-92-6

3.水1000.0毫升

4.乙醇JT26000 64-17-5

以上是实验用的试剂。请使用万得生物的优质生化试剂。

100.0克脱脂奶粉、石蕊、1000.0毫升水。

三。细菌生化检验的实验步骤

将奶粉完全溶解于水中,调节pH值至6.8,加入石蕊溶液至呈现紫蓝色(pH 6.8),分装于试管中,每管约5 mL。115℃杀菌10分钟,迅速冷却,然后放入冰箱备用。

石蕊溶液的配制方法:称取2.5 g石蕊,在碗中研磨,转移到装有40%乙醇水溶液的50 mL烧瓶中,煮沸1分钟,静置10分钟左右,吸取上清液转移到另一烧瓶中,在原烧瓶中加入50 mL 40% 40%乙醇水溶液,煮沸1分钟。

将上清液加入前一上清液中,将两种上清液混合均匀,离心沉淀,将上清液倒入100 mL量筒中,用40%乙醇补足100 mL,逐滴加入1 M盐酸,直至溶液变为紫色,即为2.5%石蕊溶液。

42.1毫升95%的乙醇和100毫升水是40%的乙醇溶液。

3.检测方法

接种试验细菌培养物18-24小时。如果是厌氧,在培养基试管中加入无菌铁屑或铁钉,盖上无菌凡士林,然后在36±1℃培养。-14天。

四、细菌生化检验实验结果的判断

1.粉色:乳糖发酵产生酸;


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2.紫蓝色:乳糖经过发酵,保持原有颜色;

3.蓝色:碱性反应,乳糖发酵,细菌分解培养基中的含氮物质产生碱性物质;

4.白色:石蕊已经恢复;

5.澄清:消化乳蛋白(蛋白糖化);

6.凝块会凝结:牛奶和鸡蛋会因为大量的酸而凝结。

7.产气:乳糖分解产生酸和气体,强烈发酵会破坏血凝块。

如果没有脱脂奶粉,将鲜奶放入冰箱过夜,去除奶油层,将脱脂牛奶在流动的蒸汽中加热消毒1小时,冷却至10摄氏度以下,用无菌纱布过滤,然后加入石蕊溶液至淡紫色,分离试管,如前消毒。

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